什么是中性粒细胞胞外陷阱（NETs）？中性粒细胞作为宿主免疫系统的“前锋部队”，其主要作战方式包括吞噬、脱颗粒作用和形成中性粒细胞胞外陷阱（NETs）。NETs，顾名思义，是一种由DNA和蛋白质编织而成的网络，具有捕获周围微生物病原体的能力。这种机制代表了一种与传统凋亡和坏死截然不同的新型细胞死亡方式，称为中性粒细胞的炎性细胞死亡（NETosis）。在这一过程中，细胞核膜破裂、染色质去凝集，核、细胞质以及颗粒成分相互混合，最终导致中性粒细胞的自我牺牲。

研究表明，基于全光谱流式细胞术的NETs检测方案已经被惠灵顿奥塔哥大学与维多利亚大学的研究团队所开发。该方案能够从人体外周血中分离出粒细胞，并通过检测中性粒细胞附着的胞外DNA及多种NET相关颗粒蛋白（如MPO、NE、H3cit）来识别NETs。此外，它还能有效区分NETosis细胞（ZombieNIRdim7AAD+）与坏死细胞（ZombieNIR+7AAD+）。

在优化NET+中性粒细胞的染色条件和门控策略方面，研究人员采用不同浓度的PMA刺激，从外周血中分离出的粒细胞，诱导NETs的形成。研究发现，PMA的最佳浓度范围为19-133nM。在细胞经过染色后，利用CytekAurora全光谱分析型流式细胞仪进行数据采集和分析，经过标记CD66b、CD15和CD16后，可以准确识别出NET+中性粒细胞。此外，通过特定的表型标记和DNase I处理，能够显著降低NET+中性粒细胞的比例，有效证明了该方案对胞外DNA的特异性识别能力。

在炎性疾病患者的研究中，采用相同的检测方案分析稳定性冠心病（Stable CAD，慢性炎症）和急性心肌梗死（AMI，急性炎症）患者的外周血样品，结果显示，AMI患者的NET+中性粒细胞显著高于稳定性CAD患者。这一发现为急性炎症的临床评估提供了新的思路。

综上所述，基于三激光CytekAurora全光谱分析型流式细胞仪的NETs检测平台，不仅提高了NETs定量检测的特异性和准确性，还具有广阔的应用潜力。通过精准识别CD66b+CD15+中性粒细胞，并结合NETs特征性标记，该方案为研究急性炎症患者中NET+中性粒细胞的累积现象提供了有效手段。未来，该检测方案还可扩展至检测其他细胞的外泌体形成，进一步探索炎症反应的更多维度。

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