外泌体是机体内天然信息传递的重要载体，在细胞间通信中发挥着不可或缺的作用。由于蛋白质是外泌体的关键组成成分，分析外泌体的蛋白质组成对其功能研究具有重要意义。基于质谱的蛋白质组学技术为外泌体蛋白质的分析提供了有力的技术支持。通过全面研究外泌体中的蛋白质，我们能够深入了解其在生命活动中的作用，同时发现与疾病相关的蛋白质，这将有助于作为疾病早期诊断和预后评估的生物标志物。

环亚集团·AG88为您提供外泌体非标记定量蛋白组学（DIA、Labelfree）以及同位素标记定量蛋白组学（SILAC、iTRAQ、TMT）等专业服务。

技术原理

iTRAQ（isobaric tagging for multiplexed relative and absolute quantitation）和TMT（tandem mass tag）是目前广泛应用的蛋白质定量方法之一。这两种方法原理相似，均为化学标记方法。由于制造商的不同（iTRAQ由ABSciex生产，TMT由ThermoFisher生产），它们的标记规格和标签分子结构存在差异。这两种方法能够检测低丰度蛋白、胞外蛋白、膜蛋白及其他类型的蛋白，并可同时处理多个样本，做到鉴定和定量的快速准确，适合比较蛋白组分析与差异蛋白的鉴定。

SILAC技术

SILAC（Stable Isotope Labeling by Amino Acids in Cell Culture）的基本原理是通过细胞培养，利用天然同位素或稳定同位素取代相应的氨基酸。经过5-6次传代后，稳定同位素将完全掺入新合成的蛋白质中。不同标记的细胞或蛋白按照比例混合后进行质谱鉴定。如果峰值呈现为1：1，则说明此蛋白的含量没有差异；如果含有重型氨基酸的峰值偏高，说明此组别中该蛋白含量更高。SILAC的优点有蛋白标记效率高，灵敏度强，且仅需少量样本，缺点是实验耗时较长。

Labelfree非标记定量技术

Labelfree非标记（Labelfree）蛋白质定量采用液质联用技术，将蛋白质酶解为多肽后进行质谱分析，并通过计算蛋白肽段的鉴定数目及色谱峰面积进行相对定量。该方法的优势在于没用昂贵的标签内标，样本制作过程简便，且通过减少操作步骤来降低人为和系统误差。然而，与标记定量相比，数据分析的复杂性更高，重复性较差，对仪器的稳定性要求也较高。可以通过在样本中添加已知含量的标准蛋白实现绝对定量。

DIA技术

DIA（Data Independent Acquisition）是近年来备受关注的质谱采集技术之一，属于非标记技术的一种。DIA技术在质谱数据采集时，通过高速循环全面扫描每个采集窗口内的所有母离子及其碎裂后的子离子。这一方法相较于传统的Labelfree，具备高效测定复杂样本中低丰度蛋白质的优点，显著提高了定量分析的可信度。

服务流程

客户可提供血清、血浆、脑脊液、尿液、胸水、腹水、唾液等体液样本，以及细胞上清、植物样本和其他特殊样本，亦可提交已提取好的外泌体。样本前处理要求根据具体研究目的和方法进行调整。

环亚集团·AG88是一家专注于质谱技术的创新型生物科技公司，致力于开发外泌体精确诊疗产品。公司已成功建立多个技术平台，覆盖包括外泌体检测、保存及递送等领域，现有超过50个货架产品。我们的成果多次发表在国际知名期刊上，是国家科技中小型企业和江苏省民营科技企业，申请了多个国家发明专利。